1.  寫標簽

任何一個實驗，在動手操作前均需shou先將器皿用記號筆做上記號，培養皿的記號一般寫在皿底上。如果寫在皿蓋上，同時觀察兩個以上培養皿的結果，打開皿蓋時，容易混淆。用記號筆寫上班級、姓名、日期，本次實驗還要寫上樣品來源（如實驗室空氣或無菌室空氣或頭發等），字盡量小些，寫在皿底的一邊，不要寫在當中，以免影響觀察結果。

2.  實驗室細菌檢查

（1）空氣將一個肉膏蛋白胨瓊脂平板放在當時做實驗的實驗室，移去皿蓋，使瓊脂培養基表面暴露在空氣中；將另一肉膏蛋白胨瓊脂平板放在無菌室或無人走動的其他實驗室，移去皿蓋。一小時后蓋上兩個皿蓋。

（2）實驗臺和門的旋鈕

①用記號筆在皿底外面中央畫一直線，再在此線中間處畫一垂直線。

②取棉簽左手拿含有棉簽的試管，在火焰旁用右手的手掌邊緣和小指、無名指夾持棉塞（或試管帽），將其取出，將管口很快地通過煤氣燈（或酒精燈）的火焰，燒灼管口；輕輕地傾斜試管，用右手的拇指和食指將棉簽小心地取出。放回棉塞（或試管帽），并將空試管放在試管架上。

③弄濕棉簽左手取滅菌水試管，如上法拔出棉塞（或試管帽）并燒灼管口，將棉簽插入水中，再提出水面，在管壁上擠壓一下以除去過多的水分，小心將棉簽取出，燒灼管口，放回棉塞（或試管帽），并將滅菌水試管放在試管架上。

④取樣將濕棉簽在實驗臺面或門旋鈕上擦拭約2平方厘米的范圍。

 

⑤接種，A在火焰旁用左手拇指和食指或中指使平皿開啟成一縫。再將棉簽伸入，在瓊脂表面頂端接種（滾動一下），立即閉合皿蓋。將原放棉簽的空試管拔出棉塞（或試管帽），燒灼管口，插入用過的棉簽，將試管放回試管架。

⑥劃線另取接種環在火焰上滅菌，先將環端燒熱，然后將接種環提起垂直放在火焰上，以使火焰接觸金屬絲的范圍廣一些，待接種環燒紅，再將接種環斜放，沿環向上，燒**可能碰到培養皿的部分，再移向環端，如此很快地來回通過火焰數次。

左手拿起平板，同樣開啟一縫，將滅過菌并冷卻了的接種環（可在瓊脂表面邊緣空白處試溫度，若發出濺潑聲，表示太燙），通過瓊脂頂端的接種區，向下劃線，直到平板的一半處。注意：接種環與瓊脂表面的角度要小，移動的壓力不能太大，否則會刺破瓊脂。

閉合皿蓋，左手將平板向左轉動**空白處，右手拿的接種環再在火焰上燒灼，使冷。接種環通過前面劃的線條再在瓊脂的另一半，從上向下來回劃線**1/2處。

燒灼接種環，轉動平板，劃**后1/4，立刻蓋上皿蓋，燒灼接種環，放回原處。整個劃線操作均要求無菌操作，即靠近火焰，而且動作要快。

3.  人體細菌的檢查

（1）手指（洗手前與洗手后）

①分別在兩個瓊脂平板上標明洗手前與洗手后（當然，班級、姓名、日期各項在每次寫標簽時是必不可少的）。

②移去皿蓋，將未洗過的手指在瓊脂平板的表面，輕輕地來回劃線，蓋上皿蓋。

③用肥皂和刷子，用力刷手，在流水中沖洗干凈，干燥后，在另一瓊脂平板表面來回移動，蓋上皿蓋。

（2）頭發：在揭開皿蓋的瓊脂平板的上方，用手將頭發用力搖動數次，使細菌降落到瓊脂平板表面，然后蓋上皿蓋。

（3）咳嗽：將去蓋瓊脂平板放在離口約6~8 cm 處，對著瓊脂表面用力咳嗽，然后蓋上皿蓋。

（4）鼻腔

①按照實驗臺檢查法的步驟②和③，取出棉簽，并將其弄濕。

②用濕棉簽在鼻腔內滾動數次。

③按實驗臺檢查法的步驟④和⑤，接種與劃線，然后蓋上皿蓋。

4.  將所有的瓊脂平板翻轉，使皿底在上，放37℃培養箱，培養1~2天。

5.  結果記錄方法

（1）菌落計數在劃線的平板上，如果菌落很多而重疊，則數平板**后1/4面積內的菌落數。不是劃線的平板，也一分為四，數1/4面積的菌落數。

（2）根據菌落大小、形狀、高度、干濕等特征觀察不同的菌落類型。但要注意，如果細菌數量太多，會使很多菌落生長在一起，或者限制了菌落生長而變得很小，因而外觀不典型，故觀察菌落的特點時，要選擇分離得很開的單個菌落。

菌落特征描寫方法如下：

①大小大、中、小、針尖狀。可先將整個平板上的菌落粗略觀察一下，再決定大、中、小的標準，或由教師指出一個大小范圍。

②顏色黃色、金黃色、灰色、乳白色、紅色、粉紅色等。

③干濕情況干燥、濕潤、粘稠。

④形態圓形、不規則等。

⑤高度扁平、隆起、凹下。

⑥透明程度透明、半透明、不透明。

⑦邊緣整齊、不整齊。

6.  結果

（1）將你自己的平板結果記錄于下表中。